Ki sa ki PCR ak poukisa li enpòtan?

PCR, oswa reyaksyon chèn polymerase, se yon teknik ki itilize pou anplifye sekans ADN.Li te premye devlope nan ane 1980 yo pa Kary Mullis, ki moun ki te bay Pri Nobèl nan Chimi an 1993 pou travay li.PCR te revolusyone byoloji molekilè, sa ki pèmèt chèchè yo anplifye ADN nan ti echantiyon yo epi etidye li an detay.

PCR se yon pwosesis twa etap ki pran plas nan yon sikilasyon tèmik, yon machin ki ka rapidman chanje tanperati a nan yon melanj reyaksyon.Twa etap yo se denaturasyon, rkwir, ak ekstansyon.
 
Nan premye etap la, denaturasyon, ADN doub-cheche a chofe nan yon tanperati ki wo (anjeneral alantou 95 ° C) pou kraze lyezon idwojèn yo ki kenbe de fil yo ansanm.Sa a rezilta nan de molekil ADN sèl-chachen.
 
Nan dezyèm etap la, annealing, tanperati a bese nan alantou 55 ° C pou pèmèt primè yo rkwir nan sekans konplemantè yo sou ADN nan yon sèl-bloke.Prensipal yo se moso kout nan ADN ki fèt pou matche ak sekans enterè sou ADN sib la.
 
Nan twazyèm etap la, ekstansyon, tanperati a ogmante nan anviwon 72 ° C pou pèmèt Taq polymerase (yon kalite ADN polymerase) sentèz yon nouvo fil ADN ki soti nan primè yo.Taq polymerase a sòti nan yon bakteri ki ap viv nan sous dlo cho epi li kapab kenbe tèt ak tanperati ki wo yo itilize nan PCR.

Apre yon sik PCR, rezilta a se de kopi sekans ADN sib la.Lè w repete twa etap sa yo pou yon kantite sik (tipikman 30-40), kantite kopi sekans ADN sib la ka ogmante eksponansyèlman.Sa vle di ke menm yon ti kantite ADN kòmanse ka anplifye pou pwodui dè milyon oswa menm milya kopi.

 
PCR gen anpil aplikasyon nan rechèch ak dyagnostik.Yo itilize li nan jenetik pou etidye fonksyon jèn ak mitasyon yo, nan forensics pou analize prèv ADN, nan dyagnostik maladi enfektye pou detekte prezans patojèn, ak nan dyagnostik prenatal pou tès depistaj maladi jenetik nan fetis yo.
 
PCR tou te adapte pou itilize nan yon kantite varyasyon, tankou quantitative PCR (qPCR), ki pèmèt kantite ADN yo dwe mezire ak ranvèse transcription PCR (RT-PCR), ki ka itilize pou anplifye sekans RNA.

Malgre anpil aplikasyon li yo, PCR gen limit.Li mande pou konesans nan sekans sib la ak konsepsyon de primè apwopriye, epi li ka gen tandans fè erè si kondisyon reyaksyon yo pa optimize kòrèkteman.Sepandan, avèk atansyon eksperimantal konsepsyon ak ekzekisyon, PCR rete youn nan zouti ki pi pwisan nan byoloji molekilè.